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原代細(xì)胞(primaryculturecell)是指從機(jī)體取出后立即培養(yǎng)的細(xì)胞。有人把培養(yǎng)的1代細(xì)胞與傳10代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞培養(yǎng)。原代細(xì)胞不僅廣泛應(yīng)用于分子、細(xì)胞生物學(xué)和生物醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)研究,如蛋白質(zhì)組學(xué)、基因組學(xué)、細(xì)胞株(系)研究、DNA,RNA和遺傳學(xué)研究等,還可應(yīng)用于當(dāng)今熱門的生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)如藥物篩選、藥物代謝和毒理研究、癌癥藥物的研究等。原代細(xì)胞的培養(yǎng)原代細(xì)胞的培養(yǎng)是指直接從機(jī)體取下細(xì)胞、組織和器官后立即進(jìn)行培養(yǎng)。因此,較為嚴(yán)格地說(shuō)是指成功傳代之前的培養(yǎng),此時(shí)的細(xì)...
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一、斜面接種(1)在肉膏蛋白胨斜面試管上,用記號(hào)筆寫上將接種的菌名、日期和接種者。(2)點(diǎn)燃酒精燈或煤氣燈。(3)將菌種試管和待接種的斜面試管,用大拇指和食指、中指、無(wú)名指握在左手中,并將中指夾在兩試管之間,使斜面向上,成水平狀態(tài),在火焰邊用右手松動(dòng)試管塞,以利于接種時(shí)拔出。(4)右手拿接種環(huán)通過(guò)火焰燒灼滅菌,在火焰邊用右手的手掌邊緣和小指,小指和無(wú)名指分別夾持棉塞(或試管帽),將其取出,并迅速燒灼管口。(5)將滅菌的接種環(huán)伸入菌種試管內(nèi),先將環(huán)接觸試管內(nèi)壁或未長(zhǎng)菌的培養(yǎng)基,...
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細(xì)胞還養(yǎng)不好嗎?早該這樣做了細(xì)胞培養(yǎng):是指細(xì)胞在體外的培養(yǎng)技術(shù),即在無(wú)菌條件下,從機(jī)體中取出組織或細(xì)胞,模擬機(jī)體內(nèi)正常生理狀態(tài)下生存的基本條件,讓它在培養(yǎng)皿中繼續(xù)生存、生長(zhǎng)和繁殖的方法。通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)我們可以獲得大量的、性狀相同的細(xì)胞,以便于研究細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)、化學(xué)組成及功能和機(jī)制。細(xì)胞真的很脆弱,就像小嬰兒一樣,需要你無(wú)微不至的關(guān)懷在還沒(méi)有開(kāi)始培養(yǎng)它們之前,你就需要做好這些準(zhǔn)備。包括耗材的處理、試劑的配置,無(wú)菌檢驗(yàn)等等。玻璃器皿的清洗,對(duì)于玻璃器皿(細(xì)胞瓶、裝營(yíng)養(yǎng)液的瓶子、小...
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科研菌株又稱品系,表示任何由一個(gè)獨(dú)立分離的單細(xì)胞(即單個(gè)病毒粒子)繁殖而成的純種群體及其后代。因此,一菌株種微生物的每一個(gè)不同來(lái)源的純培養(yǎng)物均可稱為該菌種的一個(gè)菌株。根據(jù)科研菌株的定義科研菌株實(shí)際上是某一微生物達(dá)到"遺傳性純"的標(biāo)志,一旦菌株發(fā)生變異,均應(yīng)標(biāo)上新的菌株名稱。當(dāng)進(jìn)行菌種保藏、篩選或科學(xué)研究時(shí),在進(jìn)行學(xué)術(shù)交流或發(fā)表論文時(shí),在利用菌種進(jìn)行生產(chǎn)時(shí),都必須同時(shí)標(biāo)明該菌種及菌株名稱。科研菌株間在某些特性上存在著或多或少的差異.有一定的編號(hào).如生產(chǎn)蛋白酶的為枯草桿菌1398...
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要認(rèn)識(shí)血清,首先要明確全血和血漿的概念。全血包括血細(xì)胞和血漿,血漿是全血除了血細(xì)胞外的淡黃色液體,包括水、白蛋白、球蛋白、電解質(zhì)、各種凝血因子等,當(dāng)全血中加入抗凝劑,經(jīng)離心后除去血細(xì)胞即可分離獲得血漿。而血清為全血自然凝固(凝血系統(tǒng)激活)形成血凝塊后析出的淡黃色液體,雖然肉眼觀與血漿沒(méi)有什么區(qū)別,但二者所含成分不同,主要區(qū)別在于血清不含纖維蛋白原。血清是由血漿去除纖維蛋白原而形成的一種很復(fù)雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏?..
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一、一抗選擇需要確定或參考的信息(一)目的蛋白的信息確定想檢測(cè)的目的蛋白是否與抗體識(shí)別蛋白信息吻合,注意中英文名字、別名等信息。某些蛋白具有多種不同的亞型,這需要在選擇抗體之前確定要研究的蛋白亞型。還有些抗體由于其抗原選擇的是不同蛋白亞型共有的肽段區(qū)域,是可以同時(shí)識(shí)別多個(gè)亞型的。有的蛋白通過(guò)剪切加工才能轉(zhuǎn)變?yōu)槌墒斓幕钚孕问?,如Caspase、Insulin等,這就需要根據(jù)研究需要,選擇針對(duì)前體或成熟形式的特異性抗體。(二)抗體制備所用抗原的信息抗體是由各種不同抗原免疫宿主而制...
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技術(shù)講堂—抗體相關(guān)知識(shí)(1)抗體(antibody)是生物體在抗原物質(zhì)刺激下,由B細(xì)胞分化成的漿細(xì)胞所產(chǎn)生的、可與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合反應(yīng)的免疫球蛋白(Ig)。按抗體的來(lái)源,可將其分為天然抗體和人工制備的抗體,是通過(guò)對(duì)特定生物體免疫接種特定抗原物質(zhì)后而獲得。人工免疫動(dòng)物制備的抗體應(yīng)用甚為廣泛,既可以用于科學(xué)研究,也可以用于疾病的預(yù)防、診斷和治療。一、抗體的基本結(jié)構(gòu)經(jīng)x線晶體衍射結(jié)構(gòu)分析發(fā)現(xiàn),抗體Ig由四條多肽鏈組成,各肽鏈之間由數(shù)量不等的鏈間二硫鍵連接。Ig可形成“Y”字型...
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培養(yǎng)基是供微生物、植物組織和動(dòng)物組織生長(zhǎng)和維持用的人工配制的養(yǎng)料,一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無(wú)機(jī)鹽(包括微量元素)以及維生素和水等。不同培養(yǎng)基可根據(jù)實(shí)際需要,添加一些自身無(wú)法合成的化合物,即生長(zhǎng)因子。有些微生物,如自養(yǎng)型微生物,不需要碳源,所以上述物質(zhì)只具有一般性。培養(yǎng)基由于配制的原料不同,使用要求不同,而貯存保管方面也稍有不同。一般培養(yǎng)基在受熱、吸潮后,易被細(xì)菌污染或分解變質(zhì),因此一般培養(yǎng)基必須防潮、避光、陰涼處保存。對(duì)一些需嚴(yán)格滅菌的培養(yǎng)基,較長(zhǎng)時(shí)間的貯存,必須放在...
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